※ 引述《eriel (橘子数)》之铭言： : 其实我觉得不一定得synchronization : 用一些positive control应该就可以看出来transfection的动作是否会影响cell cycle : 就我所知Synchronization通常是不加入FBS，让细胞停滞在G0/G1 phase : (也许有其他的方法，请各位版友指正) 方法不少，每个的phase有不同方法 : 但如果transfection的动作就会造成G0/G1 arrest : 那synchronizaion後，反而看不出细胞因为transfecion而有G0/G1 arrest 不是在synchronizaion时看arrest 而是之後的release,才能看出cycle progression是否与transfection有关 通常一个protein影响cell cycle，不见得会是arrest 甚至,常常是progression的速度出现变化 : 所以我觉得如果可以用G2/M arrest的positive control药物，如cisplatin : 比较transfection後的细胞是否也有G2/M arrest或是G0/G1说不定可行？ cisplatin是bi-functional DNA alkylator 在S phase的影响甚至比G2/M多 : ※ 引述《ricemushroom (ricemushroom)》之铭言： : : 我想看细胞transfection 後 : : 是否影响细胞的cell cycle : : 但我想先将细胞Synchronization 後 : : 在看transfect 的基因 : : 是否影响细胞的cell cycle : : 请问版上的大大 : : 我是要先加药让细胞Synchronization 再 transfect : : 还是先transfect 再Synchronization?? : : 如果是先transfect : : 那我要transfect後多久时间 再加药去Synchronization?? : : 谢谢 我会至少24h看到基因表现後，再去做synchronizaion 另外，俟收细胞时间点的protien量是否顺利表现，再做调整 --

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