※ 引述《damnedest (ohoh)》之铭言： : ※ [本文转录自 Biotech 看板] : 作者: damnedest (ohoh) 看板: Biotech : 标题: [求救] 石蜡切片 : 时间: Mon Aug 25 21:07:54 2008 : 【问题】：石腊切片一直有出现刀痕，即使换了新刀片也没有改善 : 且大多数的刀痕都出现在sample附近 : 【个人看法】：实验室的学长认为是sample处理上的问题 : 不知道是否是自动脱水机reagen太久没更新所致 : 但因自动脱水机还有其他lab也在使用， : 也问过常在使用的实验室 : 并无出现相关问题 : 先来说说我的sample处理方式好了 : 这样或许大家比较能够帮我一起找出问题 : 我的sample是小鼠的thymus : 取下thymus後 : 先浸泡在1X PBS中 : 待将结缔组织清除後 : 即丢入10% formalin中 : 4 degree overnight 不用放PBS，直接放10% formalin，室温即可， 或是微微加温也可以，不过要注意不要煮熟了。 然後像thymus这种富含lymphoid cell的tissue最好formalin泡overnight， 不然细胞会缩小，影响判读。 (不过也有可替代的，我忘记是不是B5还是别的。) : 隔天以1X PBS清洗後 : 把sample泡在70% EtOH中 上两个步骤可以省去。 : 并以自动脱水机处理o/n 自动脱水机的solution要定期更换，不然脱水会脱不完全。 还有自动脱水机也要定时去清洗，用机器本身的program去清洗。 : 脱水完後 : 以wax包埋 : 以上 : 先谢谢大家帮忙了 1.换刀片 2.切之前过冰过久一点 3.捞片问题 4.脱水不完全 挑个脂肪多的组织 试试看 如果连切都切不出来 就是脱水不完全 不过记得组织放小块点喔 5.其他 我也不知道耶 哈 问切片医检师都直接说就这麽切 手感吧 -- I believe in Spinoza's God who reveals himself in the orderly harmony of what exists, not in a God who concerns himself with fates and actions of human beings. --

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