※ [本文转录自 Chemistry 看板 #1DYt3U7g ] 作者: euphonium15 (心动梦幻) 看板: Chemistry 标题: [实验] 电泳胶体的制备 时间: Fri Mar 25 00:27:08 2011 原PO的领域不是做电泳相关研究~ 电泳实验也从来没有碰过~更不用说要制备胶体Orz 如今碰到了一点问题~想来询问有经验的板友~ 详情如下: 原PO前几天接获老板指示要根据一篇文献制作Diffusive Gels出来~ 看了一下所需要的药品~ 1. Acrylamide 2. Agarose cross-linker 3. Ammonium persulfate 4. TEMED 上网查了一些资料~发现似乎跟跑电泳用的胶体类似~ 根据文献~原PO使用了下面的步骤: 1. 25mL 15% Acrylamide+7.5mL 0.3% Agarose+ 17.5mL DI Water当stock solution. 2. 取10mL stock solution加入70uL Ammonium persulfate以及20uL TEMED充分混合. 3. 装入holder後,迅速放入约40度左右的烘箱约60分钟. 理论上出来的应该是跟果冻一样的胶体才对~不过原PO做出来的应该只能说是胶水Orz 不知道是哪里出了问题~理论上应该跟文献有一样的结果才对~ 自己的猜测: 1. 因为使用的药品跟文献的厂牌不一样,导致成胶的能力也会略有差异? 如果是这样的话,是否加入多一点Ammonium persulfate或是TEMED可以改善呢? 2. 因为文献制作出来的Diffusive Gels厚度只有0.4mm之间. 原PO只是先行测试成胶的能力,因此只是大概找个holder让它成形而已. 厚度大概有1-2mm左右,不知道厚度会不会影响到成胶的能力? 3. 此外文献为了让gel成形,使用了两片玻璃将其夹住後再放入烘箱. 原因同2.一样,原PO只是先行测试成胶的能力好坏,并没有这样处理. 不知道这会不会也是关键的因素之一呢? 希望有经验的板友可以给点意见~总比一个人在那瞎子摸象好XD --

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