※ 引述《peik35 (P)》之铭言： : 因为Paper关系,念到perforated-patch技术 : 本身不是走电生理相关,所以对一些专有名词查过之後,仍不太清楚 : 所以上来请教各位 : 源由: : 这篇paper在这部分主要是探讨,对於一个钙离子通道,使用perforated-patch技术 : 来分辨此通道为 inwardly-rectifying 或是 outwardly-rectifying : 我想问的是: : 1. perforated patch指的是什麽? 跟 whole cell差异是? perforated patch是一种实验难度较高的纪录方法, 能避免实验配制的细胞内液影响真正 细胞质组成, 比如细胞内氯离子浓度或是特殊胜肽蛋白(polyamine or G-protein). 实验方法是在记录用的玻璃电极内loading能将细胞膜打洞的antibiotics, 比如 amphotericin B or Gramicidin, 而只有後者能打出只通透单价阳离子的通道. 相对地, whole cell recording就是完全打通细胞膜, 其配制的internal solution应会 取代原本的细胞内液. 由於perforated patch要在膜上打洞, antibiotics的浓度和internal solution组成都会 影响实验进行所需的时间和成功机率, 一般而言要打到Rs<100 MOhm signal才会够好, 时间大约是半小时, 如果internal solution的condition没抓好, 可能打一个小时都没动 静, 或是可能打十分钟就破了, 因此实验难度颇高 : 2. inwardly-rectifying 或是 outwardly-rectifying各表示什麽? inward currents: 就是指实验纪录到的向下电流(在Y轴上为负值), 代表细胞depolarized 了, 放大器为了要控制细胞在特定电位(voltage-clamp), 因而透过电极注入细胞的负电 流 相反地, 也有 outward currents 所以inward 和 outward 指的是方向, 而rectifying则是在形容电流的非线性变化 当细胞膜被控制在不同电位时, 比如-70~+70 mV, 纪录特定离子通道打开所产生的电流, 分析电位与电流的变化时, 如果在Y<0的部分, 电流呈现非线性变化, 而Y>0呈现线性变化 , 称作inwardly-rectifying 或是 inward rectification, 反之则是 outward rectification : 3. 另外这张图是paper上的Data,http://ppt.cc/hIKy 红线是指加入ligand前, : 黑线是表示加入ligand後,钙离子通道的情形,而这要如何解释此通道为inwardly : 或是 outwardly-rectifying ? 根据上面的说明便能解释为inward rectification : 不好意思,因为对於问题本身的了解,可能给的资讯还不够,请各位见谅! --

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