作者a22028504 (T.L.王)
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标题Re: [实验] 关於层析管柱相关问题
时间Tue Sep 24 10:04:02 2024
看到这麽有经验的文章,受益良多
但想问一下,
HP-20树脂,比起凝胶型树脂
是大孔树脂我明白,
但为何会另一个特性是离子交换型
这我就不懂了
查了网路定义
Ion exchange chromatography media contain negatively or positively charged funct
ional groups covalently bound to a solid support
这简言之,好像就是固定相会有正负电荷基团吧?
但HP-20是一种聚乙烯和双烯苯的共聚物
应该不会有电荷官能基团吧?
可是网路上在卖东西又有
ion exchange resin Diaion HP-20
这我又搞不懂了
我个人偏向他是疏水性树脂啦,但徵求版友意见
※ 引述《shiaobau》之铭言
: ※ 引述《kinkilon (许我一个堂本刚吧!)》之铭言:
: : 最近在看paper...
: : 有看到几种不同类型的层析管柱以及里面填充的料...
: : 以下是我在PAPER上看到的东西:
: : 1. Cosmosil 75C18-OPN
: ^^^
: 没用过,看型号是逆相层析用的填料
: 如果是的话,它是极性筛,依极性大小分离化合物
: 适用较高极性的化合物(polar)
: 印象中这类填充料都较贵,需重覆使用
: 注意移动相不要用低极性的,胶会部份溶出
: 所以跑的sample极性也不要太低,以最低移动相能溶为主
: : 2. silica gel 60 (70-230 mesh)
: 最常见的胶,便宜,好用
: 这个是中等mesh的,另有细的 230-400 粗的35-70等等
: 所谓mesh就是我们常说的目数
: 70-230就是最大70mesh,最小230mesh
: 会过70mesh的筛网,不会过230mesh的
: 粒径大小介於这之间,其余类推
: 这也是极性筛,适用中低极性化合物
: 移动相极性不可太高,会将胶体溶出
: 因较便宜,所以用一次就丢弃
: 常以n-hex 填柱,乾式上柱
: : 3. Diaion HP-20
: 这是日本三菱公司出品的
: 对岸常称大孔树脂,是离子交换型
: 常用方法为是使用适当的移动相让sample通过
: 使部分化合物吸附在树脂上
: 再用另种移动相将它洗下
: 通常可再生後再使用
: 记得报价大约每升1000-2000 NTD(有分装过的价钱,原厂较便宜,但大包装)
: : 4.Sephadex LH-20
: 常用的分子筛,但也能做极性筛使用
: 以分子筛为用的话,常只用一种移动相来跑
: 大分子会较快出来,小分子较慢
: 做极性筛则会改变移动相,逆相跑法
: 不能用太低极性的溶剂,胶会坏
: 一定是重覆使用,除非您待的实验室非常有钱
: 记得一罐500g,以前买好像是5万
: 以甲醇或二氯甲烷等填柱,湿式上柱
: : 我只知道其中3.是属於离子交换~
: : 4.则是可依分子大小来纯化样品的东西~~那它是可以分离多大的分子量的呢??是1500吗
?
: : 然後1.它是属於何种特性的填充料??一样是离子交换吗??
: 分离多大分子量,印象中没特别写
: 但注意sample不要太脏,以前做天然物
: 都会先用si-gel通一次flash column
: 再用LH-20跑,不然一下去卡脏,前面一小段要弃去,会心痛..
: 印象中它是葡聚糖凝胶,原理是每一个球中间有很多小孔洞
: 大分子进不去小孔洞,会从旁边流过,所以速度快
: 小分子会通过小孔洞,跑的路径较大,速度较慢
: : 2.後面的(70-230 mesh)他是什麽用意啊??是网住介於70~230分子量大小的东西吗??
: 如上所说,那是目数,与粒径相关,
: 用越粗的,packing起来的管柱间隙越大
: 理论上全开流速较快,但分离效果较差
: 越细则相反,但也与packing技术有关
: : 因为我想要照着PAPER上所说的步骤下去做实验...
: : 虽然说PAPER上写的一定不完整....但是我还是想要搞懂它....
: : 因为之後我要找其他的替代品来代替上面这些东西.....所以想要知道他们的特性...
: : 我有请辜狗大师帮我的忙....可是找到的东西真的有限...@@"
: : 不知道有哪位大大可以帮我的忙~~~
: 这些东西,色层分析相关的课应该有吧.@@.
: 加修个实验课,应该会有用到
: 贵的可能只会让你们看一下,
: 像si-gel应该都会让你们packing看看
: 附带一提,取gel时最好都要戴口罩.
: 有些gel不会或不易被分解,吸多了会变矽肺病
: 一些浅见,如果有说错再请其他大大指教
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1F:推 reckson1017: 表面有特定官能机 10/29 21:56
2F:推 HPLC: 以前实验是在抓黄酮类的 11/26 16:10