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看到这麽有经验的文章,受益良多 但想问一下, HP-20树脂,比起凝胶型树脂 是大孔树脂我明白, 但为何会另一个特性是离子交换型 这我就不懂了 查了网路定义 Ion exchange chromatography media contain negatively or positively charged funct ional groups covalently bound to a solid support 这简言之,好像就是固定相会有正负电荷基团吧? 但HP-20是一种聚乙烯和双烯苯的共聚物 应该不会有电荷官能基团吧? 可是网路上在卖东西又有 ion exchange resin Diaion HP-20 这我又搞不懂了 我个人偏向他是疏水性树脂啦,但徵求版友意见 ※ 引述《shiaobau》之铭言 : ※ 引述《kinkilon (许我一个堂本刚吧!)》之铭言: : : 最近在看paper... : : 有看到几种不同类型的层析管柱以及里面填充的料... : : 以下是我在PAPER上看到的东西: : : 1. Cosmosil 75C18-OPN : ^^^ : 没用过,看型号是逆相层析用的填料 : 如果是的话,它是极性筛,依极性大小分离化合物 : 适用较高极性的化合物(polar) : 印象中这类填充料都较贵,需重覆使用 : 注意移动相不要用低极性的,胶会部份溶出 : 所以跑的sample极性也不要太低,以最低移动相能溶为主 : : 2. silica gel 60 (70-230 mesh) : 最常见的胶,便宜,好用 : 这个是中等mesh的,另有细的 230-400 粗的35-70等等 : 所谓mesh就是我们常说的目数 : 70-230就是最大70mesh,最小230mesh : 会过70mesh的筛网,不会过230mesh的 : 粒径大小介於这之间,其余类推 : 这也是极性筛,适用中低极性化合物 : 移动相极性不可太高,会将胶体溶出 : 因较便宜,所以用一次就丢弃 : 常以n-hex 填柱,乾式上柱 : : 3. Diaion HP-20 : 这是日本三菱公司出品的 : 对岸常称大孔树脂,是离子交换型 : 常用方法为是使用适当的移动相让sample通过 : 使部分化合物吸附在树脂上 : 再用另种移动相将它洗下 : 通常可再生後再使用 : 记得报价大约每升1000-2000 NTD(有分装过的价钱,原厂较便宜,但大包装) : : 4.Sephadex LH-20 : 常用的分子筛,但也能做极性筛使用 : 以分子筛为用的话,常只用一种移动相来跑 : 大分子会较快出来,小分子较慢 : 做极性筛则会改变移动相,逆相跑法 : 不能用太低极性的溶剂,胶会坏 : 一定是重覆使用,除非您待的实验室非常有钱 : 记得一罐500g,以前买好像是5万 : 以甲醇或二氯甲烷等填柱,湿式上柱 : : 我只知道其中3.是属於离子交换~ : : 4.则是可依分子大小来纯化样品的东西~~那它是可以分离多大的分子量的呢??是1500吗 ? : : 然後1.它是属於何种特性的填充料??一样是离子交换吗?? : 分离多大分子量,印象中没特别写 : 但注意sample不要太脏,以前做天然物 : 都会先用si-gel通一次flash column : 再用LH-20跑,不然一下去卡脏,前面一小段要弃去,会心痛.. : 印象中它是葡聚糖凝胶,原理是每一个球中间有很多小孔洞 : 大分子进不去小孔洞,会从旁边流过,所以速度快 : 小分子会通过小孔洞,跑的路径较大,速度较慢 : : 2.後面的(70-230 mesh)他是什麽用意啊??是网住介於70~230分子量大小的东西吗?? : 如上所说,那是目数,与粒径相关, : 用越粗的,packing起来的管柱间隙越大 : 理论上全开流速较快,但分离效果较差 : 越细则相反,但也与packing技术有关 : : 因为我想要照着PAPER上所说的步骤下去做实验... : : 虽然说PAPER上写的一定不完整....但是我还是想要搞懂它.... : : 因为之後我要找其他的替代品来代替上面这些东西.....所以想要知道他们的特性... : : 我有请辜狗大师帮我的忙....可是找到的东西真的有限...@@" : : 不知道有哪位大大可以帮我的忙~~~ : 这些东西,色层分析相关的课应该有吧.@@. : 加修个实验课,应该会有用到 : 贵的可能只会让你们看一下, : 像si-gel应该都会让你们packing看看 : 附带一提,取gel时最好都要戴口罩. : 有些gel不会或不易被分解,吸多了会变矽肺病 : 一些浅见,如果有说错再请其他大大指教 ---- Sent from BePTT on my iPhone 12 Pro --



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1F:推 reckson1017: 表面有特定官能机 10/29 21:56
2F:推 HPLC: 以前实验是在抓黄酮类的 11/26 16:10







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