使用TLC以及流column要有几个观念 1.点片不要点太大点，有时2个点靠很近你会误认是一个点 2.在点没有很大，TLC上显示却又拖尾时 要考虑一下是不是溶解度不够好 有时化合物带有一些官能基像COOH等会拖尾是正常的 遇到拖尾严重的情况可以滴一滴醋酸在溶剂系统里试试 3.选择溶剂系统，溶解度为优先 溶解度不够好化合物会在流洗过程慢慢析出 会很难收到乾净的点 接着才是控制Rf值距离 我自己习惯在0.3~0.5左右 拉低通常可以流比较乾净，但是时间就会拉很长 如果点没有靠很近我就会拉到0.5甚至更高都有可能 但建议刚开始不用想求快，练熟了再说 少数情况 点片虽然拉的动，但是用该溶剂比例却拉不出来 有时是化合物需要到一定的极性才会流出来的缘故 可以加大溶剂极性看看 然後点很多个，需要每个都分出来看时 可以在流column过程中调整溶剂比例试试 通常由低极性开始，将前面的点先分开带出来 再加大极性带出後面的点 溶剂系统其实不单只有Ethyl acetate(EA)-Hexane(HEX) dichloromethane(DCM)-Methanol(MeOH)也行 不过当MeOH比例到10%以上时溶出来的silica就会不少 真的要硬流就是流完再过滤一次吧.. 低极性的情况，DCM-Ether、DCM-HEX、Acetone-HEX等 我也有使用过 当溶剂系统改变时，点的先後顺序也会变动 一定要多点片确认一下 经验来说，少苯环的化合物可以用ether 多苯环的化合物试试DCM 刚开始不够熟练，可以多看paper 找跟自己做的相近的化合物，看看别人的溶剂系统 很多还会附上溶剂比例跟Rf值 做久了你就会有概念了 4.TLC不只一种固定相 一般最常用Silica gel glass plate(Normal phase) 当溶解度够好，但是点又拉不起来时，就是化合物极性太高 可以换成使用C-18的RP-18 glass plate(Reverse phase) 不过价格贵很多 如果要用C18流column，有的实验室会要你回收C18 gel 接着是少数的情况，化合物跟Silica亲合性很好 或是卡在column上时，可以考虑用Aluminum Oxide 这算是较中性的固定相 不过因为亲和性较低，容易冲太快 多加尝试再使用 有些更专门的实验室还会订制特殊的gel 像做生物蛋白的，这又是另一回事了 5.Packing column前，确定gel跟溶剂系统充分搅拌均匀 确实震动column让它紧实 当你Loading的化合物量大、极性高 dry-loading会是比较好的方式 方法是将化合物溶解，加入适量的silica gel 用减压浓缩将solvent去除，最好再上真空尽量抽乾 (记得在缓冲瓶塞棉花，不然gel抽上去会损害pump) 残余的高极性溶剂都可能会影响流column packing时尽量让它均匀分布在gel顶端 要小心添加solvent时不要让gel飘起 当点靠很近的时候，每根tube不要收多 有些人想少洗tube每管都收很多，收光谱才发现杂到其它点 还有TLC看不到不代表NMR看不到 必要时每一管就独立测NMR图 目前只想到这些，有想到再补 ※ 引述《ajyy002 (Amine)》之铭言： : 小的我不久前进到一间实验室做专题>< : 里面最常用的纯化方法就是流column， : 想当然尔，小喽喽就被叫去流column啊， : 以前头头都会告诉我跑液比例， : 所以一切都很顺利 : 直到不久前头头试了些新反应，要我自己用TLC找极性 : 而在TLC片上常常分不太开......但是有分开，约0.3cm左右吧 : 但是在流column收产物的时候，常常会两个点一起出来...... : 我自己觉得可能是管柱长度不够长， : 而我其实也不太会调整极性，常常TLC片上不是跑不上来就是分不开 : 我们实验室最常用的跑液是hexane、EA、DCM， : 我主要也是只会用到这三种， : 而关於跑液调配比例和长度我的头头都告诉我他是靠直觉和经验QAQ!? : 所以请问有哪位前辈有相关经验可以分享吗？我真的想要学得快一点...... -- 人类追求公正的理性、同时也顺从慾望的疯狂 伤害则沉默的站在两者之间，等待着.. --

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