作者appleson (贡丸)
看板Chemistry
标题[实验] HPLC Guard Calumn耗损过快的问题
时间Thu Jun 5 12:39:15 2014
我是用WATERS的XBridge C18的 Column做酵素动力学的实验
主要是将受质跟产物分开观察比例，但是受质跟产物都没有光吸收讯号
所以会做衍生反应接上PITC测光吸收
但现在遇到了一个很大的问题
我的Guard Column大约打80支样品谱线就会分岔，怎麽洗都没用
换一支新的之後就会恢复正常
一支大概3000元，这样的频率去换钱烧得满凶的
我的样品跟移动相的溶液都有用0.45um的滤膜过滤过
我想请问是不是有甚麽地方我没有注意到或是其实他更换的平率就是这麽快?
谢谢大家
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1F：推 cuddi:分析前有除盐吗？洗管柱是否确实？ 06/05 12:43
2F：推 frankyoda:问厂商有没有推荐的型号？或是挖掉column前段？ 06/05 17:26
3F：→ reckson1017:用0.2um滤 06/05 23:11
4F：推 HPLC:恩~有没有除盐 这满重要的!! 而且~我认为它本身就是耗材XDD 06/05 23:16
5F：→ appleson:paper上移动相还有加盐类耶 还是样品要除盐? 06/07 10:55
6F：→ appleson:管柱应该是洗得满确实的 冲提的体积有到10倍管柱体积 06/07 10:57
7F：→ appleson:请问除盐是甚麽意思 我不是化学本科出生的 化学不好XD 06/07 11:01
8F：→ tony15899:洗管柱是用什麽洗? 盐类用纯有机相洗不掉啊 06/08 15:08
9F：→ appleson:我用水洗 06/09 15:25
10F：→ shiaobau:移动相更换的频率多长? 若常用高水相 要注意长菌的问题 06/10 10:45
11F：→ shiaobau:基本上 buffer都要新鲜配置使用 洗管柱用的纯水也要新鲜 06/10 10:45
12F：→ shiaobau:如果之前没注意这个问题的话 LC常用水相的管跟要洗了... 06/10 10:46
13F：→ appleson:所有的BUFFER最久五天会换一次 瓶子也都会洗过 06/12 16:17
14F：→ appleson:我不知道五天算不算太久 大家一般都多久换一次? 06/12 16:18
15F：→ shiaobau:buffer的比例是什麽 buffer里面如果没有有机相 隔日换是 06/13 11:58
16F：→ shiaobau:比较好一点... 5天可能都快看到菌丝了... 06/13 11:58
17F：→ appleson:1mM的ammonium acetate 原来需要这麽常换XD 06/14 04:51
18F：→ shiaobau:不那麽常换 最少隔1~2天要再用0.2滤膜过滤一下 然後一实 06/16 11:11
19F：→ shiaobau:验完就冰起来...如果不难配 最好常换... 06/16 11:11
20F：推 nn1975:不要直接用100%水洗 改10%ACN+90%水 MP的水建议用DIW 06/27 00:47