※ 引述《kentai (为什麽没有爱 在我们之间)》之铭言： : 我还是没做出来>< 可恨阿 : 不论如何都得不到一个点的管>< : 我把我的步骤写一下 看大家看一下有什麽错误 很多的部分前面的版友都讲过了.. 我也是建议你请人带你做一次吧... 看起来阁下应该没啥流column的经验 : 东西有三个点 剪一片约六公分的TLC 用纯EA去跑 一般少用单一溶剂去流管柱 : 距离上端0.5cm有一个点 再间隔1cm有第二点(产物) 再间隔1cm有第三点 : 感觉是分的很开 Rf值太高了.. 这样你EA一灌下去,Rf值0.5跟0.8的点老实说没啥分离到... 请将主要的点调在Rf＝0.3左右,也就是说请换冲提液的极性.. 用hexane/EA这个系统是比较普遍的选择.. : 准备Packing Gel 用的是silica gel 使用的column是250ml 直径大概5cm吧 : 用Hexane packing ,Gel大概有20cm高，加压1次10分钟 做5次 如果你真的觉得那麽难分,可以用湿填的,效果会比较好（不过你的应该不至於难分） : load大概有3cm ，等到跑到乳化面的时候，慢慢加入EA 开始跑 loading太高,一般请在1公分左右.. 请换大一点的管柱不然就分两次流吧 你极性就已经那麽高了,还loading那麽厚一层,这样当然很容易mix在一起 : 用12x75mm的试管去接 20管左右有第1点 23~26有两点 27~点消失约80管 有三点 : 所以我大部分的产物都混在三点里面 好痛苦阿>< : 另外 Gel常常跑了却产生龟裂的现象 明明没乾 不知道为什麽@@ 因为冲提液极性变太快了 基本上你packing时就可以用hexane/EA（Rf＝0.3左右）的系统去packing了 然後流的时候就不用换冲提液了,自然也就不会龟裂了 如果你真的觉得後面出来的点太慢了,可以慢慢提高冲提液极性将後面的冲出来 当然前提是你前面的点已经出来了 如果是大量的而且又如你所说点与点之间分隔得很远的话 那其实用一下简单的flash column也可以快速得到不错的分离效果 : 不知道大家有什麽意见>< Thx! : ※ 引述《WEINUO (拥抱现在)》之铭言： : : 30公分算可怕吗@@? : : 我有看过PACKING将近50公分的....而且直径4公分 : : 实验室还有一支...直径大约有十公分的..COLUMN~至於总长度也有50公分以上 : : ..在加压下..时间大约30分钟~应该不难吧.. : : 我说的是~~不算一开始的packing和loading..也不算浓缩的时间 : : 熟练的人30分钟就可以收完了.... : : 主要的关键在solvent..如果是要收二个点以上..中途要换solvent 的比例 : : 那自然就很难30min收完 : : 本来实验室的人也不信...但看过资深的流过直径2.5cm的column : : 大约30分钟...... : : 尤其是直径愈小的column~完成时间愈短..~ : : 多流就会愈快.... : : 只是在工厂...做大量的都是做结晶....不太流column.. --

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