作者nk12914 (等待)
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标题[求救] 请问有人试过将IHC重新strip後染色的嘛
时间Thu Oct 18 18:24:15 2012
听学长说IHC的片子染完後可再strip，重新染Ab
上网看到其中一篇paper用了好几种strip buffer，分别去比较他们的效果
Antibody elution method for multiple immunohistochemistry on primary
antibodies raised in the same species and of the same subtype.
J Histochem Cytochem. 2009 Jun;57(6):567-75.
当中利用Glycine-SDS pH=2 50度C incubate 30 mins效果最好，所以想说试试看
不过现在遇到一个问题
当初用的是水溶性封片胶，所以把片子放到水里过没多久盖玻片顺利脱落
但因先前技术不好，封片封太厚，导致盖玻片掉落後，还是明显看到一层胶在上面
想说再继续泡着是不是可以让胶溶掉，但那层胶还是存在
也试着放在37度C incubator，但效果也不好
主要是担心那层胶的存在会影响後续的染色?
还是说当我在strip的过程中，因为buffer pH=2的关系，所以那层胶也可以跟着被溶掉呢?
不知道有没有板友做过类似的实验，可以提供一些经验吗?
感谢大家了~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.126.51.17
1F：→ nk12914:我用的封片胶是Dako Faramount Aqueous mounting medium 10/18 18:43
2F：→ vandia:还要strip你就别封片了,直接PBS看完拍完就可以继续下一个 10/19 15:04
3F：推 abcam:strip完後 要再染的到protein 真的是机会机会了!只能try~ 10/26 16:41