目前我实验使用的是 PC 12 嗜铬细胞瘤细胞株 目的是要研究 p35 以及它被 calpain 裂解後的 p25 由於我最後真正要拿来进行实验的是以 NGF 使其分化的成熟神经细胞 因为老板想看蛋白质表现量，所以打算以 Western blot 来进行 担心最後 lysis 细胞後的蛋白质萃取液太稀 所以选择让它在 10 cm dish 里分化，让它长多一点 但是不知道为啥养在 10 cm dish 里面又长得不如养在 6 well dish 养在 6-well dish 里又不容易用塑胶棒刮下来 因为总觉得 dish 好小不容易刮，残留的细胞应该不少 1. 请问我是否可以使用 trypsin 把成熟分化後的 PC12 打下来 接着离心，然後就加入lysis buffer？ 2. 请问有人以 Western blot 压过 p35 以及 calpain 吗？之前使用 Santa Cruz 的 p35 polyclonal rabbit IgG 发现多重 band 的现象很严重，大概会出现 4 条 後来改成使用 cell signaling 的 p335 monoclonal rabbit IgG 结果反而变成什 麽都压不出来 = =||| a. 这种多重 band 的情形是不是 p35 被裂解的缘故所造成的？有没有版友推荐压 这个蛋白质的抗体 Orz b. calpain 据说分成 large 以及 small，有版友压过任何一个吗？目前我都压出 空白片 囧.... 先感谢版友赐教罗 ~ --

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