作者yangyujou (uuuuuuuuu)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问用RNAi core Knockdown 抑癌基因
时间Tue Sep 22 20:46:08 2009
※ 引述《wenhaoshen (wenhaoshen)》之铭言:
: 请问我用RNAi Core Lentivirus knockdown 抑癌基因
: 跑Q-pcr 及 western 的确抑癌基因被knockdown 70%
: 但是接续做SRB assay- cell growth (proliferation),
: 发现抑癌基因被knockdown并没有长得比较快,
: 1.我确定有knockdown效果但是都是用2.5 ug/ml Puro去select screen and maintain?
: 2.请问subculture次数增多,真的knockdown效果不好吗?
: 3.可以给我一些建议吗?
Tumor suppresor gene 的功能有很多种,
大多的tumor suppresor knockdown 不会使cell growth 加快。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.115.55.249
1F:推 wenhaoshen:为什麽? 09/22 22:07
2F:推 kaifish:TSG应该不是以是否影响cell growth而进行定义 09/23 16:33
3F:推 wenhaoshen:是喔...那定义是? 09/23 20:15
4F:→ soom:楼上版友何不提出您认为的定义?这样也比较好讨论 09/23 22:09
5F:推 tsubasawolfy:TSG定义在平常正常状态不会干扰细胞生长 只有在oncog 09/23 22:40
6F:→ tsubasawolfy:ene不正常时才会发挥功用 09/23 22:40
7F:推 reinherd:oncogene的功能太多 可能是anti-apoptosis, 可能是promot 09/25 04:29
8F:→ reinherd:EMT, 也有可能是increase invasiveness不一定是作用在 09/25 04:30
9F:→ reinherd:proliferation, 就算再proliferation 还要考虑到这个细胞 09/25 04:30
10F:→ reinherd:株的特性 例如mcf7就很不aggresive 你如果转值同一种 09/25 04:31
11F:→ reinherd:oncogene到hs578效果就会差很多 09/25 04:32