作者soceress (赢了世界又如何)
看板Biotech
标题[讨论] Western blot同批sample跑出来结果不同的原因
时间Fri Jul 3 19:00:23 2009
同事问我,为什麽同一批sample,同样的条件与实验流程
做出来趋势为什麽在两次WB的结果趋势会不太一样??
比方说做第一次是 (一次做两片,两片趋势一样)
1 3 4 4 2 2 3 (数字表示band的强弱排序)
第二次是
1 2 4 2 4 2 2
惨一点就是同个tank里两片的趋势就不同了...
整个实验流程都没有遇到任何问题,band的形状,background也再美不过...
就是趋势不稳
不知道这样讲大家有没有看懂我描述的??
我是跟他说,可能是在呈色时的反应不均...
他的呈色方式是 ECL反应1min後
用两片滤纸吸乾,放到夹链袋里去拍冷光..
因为ECL已经被吸乾,所以不管曝光多久,亮度都不会变 (当然太短拍不到)
拍5min跟10min都一样,只是10min颗粒比较细
不知道是否还有其它原因??
请大家赐教一下~~谢谢~
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◆ From: 192.192.93.160
1F：推 luhs:我觉得跟protein定量关系比较大 07/04 01:55
2F：→ soceress:嗯..他的同一批就定量一次,配成同浓度一大管,跑个2~3重覆 07/04 10:27
3F：→ tsubasawolfy:配成一大管取之前记得摇均匀(切身经验.... 07/04 12:30
4F：→ soceress:嗯,他说他都有vortex再spin down 07/04 18:48
5F：推 LIAR:我比较想知道是差多少....western毕竟只有半定量，差距太小 07/05 23:11
6F：→ LIAR:的话实在不可信..... 07/05 23:12