作者sonpaa2 (如果爱)
看板Biotech
标题Re: [求救] 收medium去跑western,maker变型了!
时间Thu Jul 2 23:04:39 2009
我也来猜一下
重点在於"浓缩"二字
medium用哪一种啊?
原本medium中是否含盐 (请自己查罗)
sample经过浓缩後 盐类大量累积
原作者在将浓缩後的sample去跑胶片 当然跑的乱七八糟 (跑胶前请desalting)
还有加了血清的culture medium 其中的成分 都来自血清里的蛋白
因此跑胶後会很丑
个人意见 请参考
※ 引述《wenhaoshen (wenhaoshen)》之铭言：
: 我有一个问题，就是我要收细胞分泌到medium的x152蛋白质，
: 经过用含10%FBS medium培养CHO-K1三天後,
: 收集起来,并用0.22 um filter过滤及浓缩後,
: 拿去跑western, 结果跑胶造成旁边的maker严重变形变很细,
: 而且size不准,
: 而且有些抗体hybrid结果都没有出来
: 我是推断是serum造成的,
: 但是无法用无serum的medium去养CHO细胞,
: 因为细胞这样会死掉,
: 请问有经验的学长姐该如何解决呢?
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※ 编辑: sonpaa2 来自: 140.112.5.16 (07/02 23:05)