事情是这样的。 在下前一阵子将培养的细胞株， 以皮下注射的方式， 注射到裸鼠的皮下前後腿脚窝处（腹侧面）。 在注射完一周时， 基本上鼠只（N＝6）都还存活， 但我有发现鼠只的眼睛以及脚指有不正常的肿大。 然後也不是很爱动。 但是再过一周，就只有2只为活体。 老鼠肢体末端也呈现黑色坏死。 因为行政上的缘故， 所以我是在A实验室培养细胞， 回溶於PBS（高温灭菌但无过filter）中， 在骑车到实验室B的动物房注射。 我在想我的裸鼠会大去， 是不是因为细胞株在运送过程中污染？ 还是说因为我是第一次注射活体， 在没有人指导前处理的情形下， 在操作上产生污染？ （因为我有使用pipette，我後来有听说， 事实上pipette是最容易污染的， 宁可使用塑胶用过即丢的auto-pipette比较保险。） 我後来也回想说，是不是我自己灭的PBS会有问题。 （那也是我自己配的，用实验室一般用药配置） 我在想应该势必要重新再来， 所以不晓得有没有先进可以提醒我一下，哪些步骤应该要非常小心， 才不会又使裸鼠死亡？ 另我想下次直接去药局买医疗用的生理食盐水来打散细胞， 以防止自己因为自己灭的PBS出问题而使裸鼠感染。 在此我想我要简述一下我的实验步骤： 将细胞株由培养的T25上以trp打下来，离心後再打散於medium中， 之後进行细胞计数，并取适量细胞液离心，取得十的七次方细胞数/每管。 此时去除上层medium，加入高温灭菌过的PBS打散细胞，使细胞悬浮。 将装在eppendroff中以预备好的细胞悬浮注射液在flow中，置入夹链袋中， 放在口袋中保持体温，（骑车）至动物房。 以医疗用注射筒，皮下注射於裸鼠前後腿窝侧腹处。 我目前想出的改进点是，不再使用pipette， 而使用用过即丢塑胶制auto-pipette， 以及在打散的步骤中， 使用医疗用针筒打散细胞株， 并且我想用药局卖的医疗用生理食盐水取代原本自己灭的PBS （但不知此点是否可行？） 所以还请各位版友多方指正， 真的很需要各位的帮忙。 By seminar接近爆炸的硕一升硕二但却是实验室最大的忐忑研究生 -- 因为在那一漫天纷飞的落叶中， 只有一片会在愿意理解并同情的持续注视下，在那个瞬间永远静止。 ---------骆以军--------- --

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