作者s0086 (腐出肩)
看板Biology
标题[问题] Fibroblast isolat
时间Sun Dec 18 23:17:06 2016
【问题】： 初代培养纤维母细胞
【问题起因】：我们老板要我试着使用大鼠或仓鼠的皮取出纤维母细胞，
我的做法是先把整块皮取下，之後泡0.2% Dispase 一天，然後将真皮层用刀片括下，
再把真皮泡在0.1%的Collagenes type 4 一天，之後用细胞分离筛将消化液过筛，
加入无血清DMEM，离心，用DMEM 将 pellet打散，然後将细胞液培养。
现在做了三次都是底部看的到细胞，但是都是圆的，完全没有展开。
请问有大大能帮忙隔空抓药是哪边有问题吗? 或是有其他黄金Protocal可以帮忙吗?
快要拿人头去见老板了
谢谢
--
公主病是因为好男人诞生出来的，坏男人是因为公主病进化出来的。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 27.105.164.17
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biology/M.1482074230.A.63D.html
1F：→ turtle24: 泡两天感觉细胞都死光了 12/18 23:36
2F：→ e104582001: coating? 12/19 01:35
※ 编辑: s0086 (27.105.164.17), 12/19/2016 02:12:29
3F：→ s0086: 这个做法是用之前在教学医院取人体简体使用的，而且几乎没 12/19 02:13
4F：→ s0086: 都可以养的成功。 12/19 02:14
5F：→ short945: 以前是用十几天的数胚在灭菌过的铜网上面磨然後洗下来 01/05 13:41
7F：→ short945: 只是以前第三步不是用针筒吸吹而是把除去内脏的鼠胚 01/05 14:11
8F：→ short945: 放在铜网上面"均质化" 01/05 14:12