作者asdfg0612 (青蛙)
看板Biology
标题[问题] 流式细胞仪的isotype
时间Sat Jun 18 18:10:25 2016
【问题】:
想请问一下流式细胞仪是不是不同样品间
是不是该要重跑不同的isotype control ?
【问题起因】:
最近在跟教授讨论检测完的数据处理跟怎麽报告
教授认为我计算surface marker表现量的方法是有问题的
他认为isotype会切掉同一个区间後的比例
所以我应该在表上画一条直线来确定我isotype control是一致的
这样的话 positive marker的表现量应该会比我框的范围高很多
【个人看法】:
不过我觉得因为我的实验是属於使用过滤方法来进行细胞纯化
每批样品来源已经是不同实验体了 过滤後的样品还会分为三个部分
再怎麽说isotype control的表现结果也不应该会长一样
所以我每个样品都会跑一次isotype control
更不用说是直接像老师说的
用同一条线去画分出不同样品测试後的surface marker表现量
(像是
| |
cont. |__|_
| | \ 样品A
|__|__\___
|
|
| | ____
cont. | |-/
| -| 样品B
|__|______ 这样一条线切下来全切同一区块
marker
所以想请问一下 我这样的想法有没有问题 ?
如果没有问题的话有没人能帮忙给个建议让我比较容易去说服老师 ?
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1F:推 conective: isotype是看样品与抗体非专一性结合背景 若样品不同 06/19 15:44
2F:→ conective: 理应染一组ISOTYPE 而不是一组通用 那要以哪组为主? 06/19 15:45
3F:→ conective: 比如说有些细胞刺激前後背景值就不一样 06/19 15:46
4F:→ conective: 真正要分析时要以实验条件下的ISOTYPE作为判断阴阳标准 06/19 15:46
5F:推 abcam: 目前 flow的isotype我只相信 DAKO&BD 这两个品牌~ 06/19 17:02