作者snark (影燕)
看板Biology
标题Re: [问题] ELISA coating确认
时间Mon Nov 7 22:25:26 2011
※ 引述《jonsauwi (JBY)》之铭言:
: 【问题】:
: 因为实验的关系,我需要确认我的细菌全菌是否可以直接coating在ELISA plate上,
: 并能确定经过我们的实验如wash、加药剂等过程後,
: 都还能维持一定的数量吸附在plate上。
: (虽然查很多paper都显示其实是可以coating的,但是要能用实验证明)
: 【问题起因】:
: 实验需要,如果不能coating我的实验会变得很麻烦
: 【个人看法】:
: 目前想到的方法:
: 1.在细菌上做label(萤光或酵素)──老师说这太不直接、太复杂了
: 2.以番红或亚甲蓝染色後在显微镜下看──老师说太复杂且染剂里的东西不确定是否会
: 影响到实验
: 其实我认为做label是满直接的方法了,
: 但或许是我自己想到死胡同里去,
: (老师说他已有腹案,但就是不给我一点提示啊!Q_Q)
: 是否还有什麽更直接、更简单的方法可以证明细菌有没有吸附在plate上呢?
: 就算是一点点的提示也好!> <"
: 感谢!!
: 【参考资料/连结】:
: 无
不好意思
我不完了解你的实验
不过我的实验室是做biofilm的生成
所以我们都是用crystal violet 染 96 well plate 然後去测吸光值就可以了
给你参考看看
JOURNAL OF BACTERIOLOGY,
Jan. 2002, p. 290–301
Biofilm Formation and Dispersal under the Influence of the Global
Regulator CsrA of Escherichia coli
请看材料与方法中
Quantitative biofilm assay
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.124.93
1F:推 jonsauwi:感谢您,但是因为我的菌是Gram(-)的,所以才想说用番红 11/07 23:14
2F:→ jonsauwi:我想这逻辑是一样的,那时提出来老师就一直说这方法太复 11/07 23:15
3F:→ jonsauwi:杂,有更简单的方法...Q_Q 我觉得这够简单了啊... 11/07 23:15
4F:→ vixen:其实若先用酒精穿孔, CrystalViolet可染核,不分Gram+或-皆可 11/08 13:34
5F:→ jonsauwi:这样啊@@ 原来如此 11/08 14:16