作者phenil (恩恩...)
看板Biology
标题Re: [问题] 蛋白质定量的检测
时间Sun Nov 2 21:55:11 2008
※ 引述《gordonliu (阿抛)》之铭言：
: 【问题】：
: 1.Folin-酚试剂法(Lowry法)
: 2.Bradford法(考马斯亮蓝结合法)
: 3.Bicinchoninic Acid (BCA)法
: 想请问以这三种方法来测量
: 同一个蛋白质sample
: 为什麽三种方法检测出来的蛋白质含量都不一样
: 测量的原理我大概了解
: 可是有没有高手能详细解释一下
: 谢谢~
我是低手，所以不能详细解释，XD.....
为啥这三种方法测到的蛋白质含量会差很多呢？
1. sample差异
像是如果sample中含有chlorophyll a的话，
Lowry assay会有干扰，倒楣的话可能会测到四倍高的含量，
但其他两种不会有太大差异。
2. 实验步骤
像是以TCA去沈淀蛋白质的话会让Lowry和Smith assay（你说的BCA法）
所测到的蛋白质含量显着的增高，但Bradford就没有啥差异了
3. assay本身的问题
十多年前就发现Lowry有高估的现象（Smith也被认为有）
而Bradford比较不会被sample中的non-protein compound影响，
但要看你需要的方便程度还有sample决定你要用哪种方法
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◆ From: 140.112.52.216
1F：推 vixen:能有这见解算是高手了 11/03 13:56
2F：推 gordonliu:高手高手高高手 11/03 15:41
3F：→ gordonliu:感激~ 11/03 15:42