作者wangba (王八)
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标题Re: [问题]有关抽plasmid
时间Fri Nov 3 07:57:25 2006
※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之铭言:
: ※ 引述《wangba (王八)》之铭言:
: : 可以试试看在菌种养起来之後
: : 再加入少量的kanamycin (2~5mg/L)
: : 可以抑制细菌的生长
: : 但是并不会抑制plasmid的生成
: : 因此可以增加copy number
: 这招式真的嘛?可不可以提供学理文献?真的没听过耶....
我记错了,不是kanamycin,而是chromphenicol
这方法真的是可以用的,节录原文如下:
Chloramphenicol amplification
The copy numbers of the current generation of plasmids are so high that
selective amplification in the presence of chloramphenicol is not necessary
to achieve high yields. However, when low-copy-number plasmids containing the
pMB1 or ColE1 origin of replication are prepared, the yield can be improved
by adding chloramphenicol (170 mg/liter) to amplify the copy number.
http://www1.qiagen.com/Plasmid/BacterialCultures.aspx?
: 是所有菌种都可以嘛?还是哪些特殊的菌种?
: 如果copy number低的菌种,我想到的笨方法是养个1000ml 在去抽plasmid DNA
: 不然就把原来的plasmid DNA再transformation到high copy number 的菌种不就好了?
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※ 编辑: wangba 来自: 140.112.129.9 (11/03 08:00)
1F:→ jsi:我们家就是用这个! 满好用的 140.109.55.225 11/03 09:25