※ 引述《[email protected] ( )》之铭言： : ※ 引述《[email protected] (新世纪音乐)》之铭言： : > 你是用什麽protocol... : > 有时候 kit 不一定好用～ : > 我曾经用QUIGEN做midi-prep.. : > 但是对某种low copy number的vector就效果不如预期～ : > 因此我用传统方法作～（传统方法也有很多种...) : > 且加大culture volume... : > 至少达到我要的效果～ : > 且纯度也都OK～ : > 先解释清楚你用的是何种protocol才能troubleshooting阿～ : 我不是用KIT : 用的是自制的solution 1.2.3 : 在酒精沉淀 : 就跟圣经书上的差不多 : 在抽完时跑胶有微弱的band : 做完RE elute後 : 再跑胶就不见罗 : 如果照你说的加大体积的话 : 是用小体积分很多管在最後复溶时再混在一起比较好 : 还是要用large volume的protocol做比较好呢?(From molecular cloning protocol I) : 一开始的方法也是从这出来的... 用後者.....做一次banding算了一定会有DNA 建议你加入solution3後离心两次....只取上清液....别贪心 酒精沈淀後放零下20度overnight 在离心...如果pellet还是又白又大....别高兴....都是protein 用三次水溶....vortex数分後在离心.....下方pellet不要了 吸出上清液去切RE 很麻烦吧.....colume现在很便宜啦....买台制的效果就不错啦 DNA的纯度也一定比土法好....和老板建议一下 因为你之後还要切...太多protein根本是干扰.... 你run的gel loading的well处是不是很亮....都是卡这蛋白的DNA 你elute当然没东西 --

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