看板Biology
标 题Re: [问题]有关抽plasmid
发信站KKCITY (Wed Nov 1 17:23:20 2006)
转信站ptt!ctu-reader!ctu-peer!news.nctu!netnews.chu!Leo.mi.chu!zoonews.ee.nt
※ 引述《[email protected] (新世纪音乐)》之铭言:
> ※ 引述《[email protected] ( )》之铭言:
> : 在下最近在抽取plasmid
> : 但是碍於菌种copy number太低了
> : 以致於在做digest>elute後band就不见了
> : 请问高手们在plasmid copy number太低时
> : 你们会做哪些protocol shooting?
> 你是用什麽protocol...
> 有时候 kit 不一定好用~
> 我曾经用QUIGEN做midi-prep..
> 但是对某种low copy number的vector就效果不如预期~
> 因此我用传统方法作~(传统方法也有很多种...)
> 且加大culture volume...
> 至少达到我要的效果~
> 且纯度也都OK~
> 先解释清楚你用的是何种protocol才能troubleshooting阿~
我不是用KIT
用的是自制的solution 1.2.3
在酒精沉淀
就跟圣经书上的差不多
在抽完时跑胶有微弱的band
做完RE elute後
再跑胶就不见罗
如果照你说的加大体积的话
是用小体积分很多管在最後复溶时再混在一起比较好
还是要用large volume的protocol做比较好呢?(From molecular cloning protocol I)
一开始的方法也是从这出来的...
--
┌─────◆KKCITY◆─────┐▇─┐KKADSL→六星级优质连线服务
│ bbs.kkcity.com.tw │┴ └─▇ 马上申请带你上网环游全世界!
└──《From:140.120.97.144
》──┘ KKADSL ┴ http://adsl.kkcity.com.tw
--