作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)
看板Biology
标题Re: [问题]有关抽plasmid
时间Wed Nov 1 09:27:00 2006
※ 引述《wangba (王八)》之铭言:
: ※ 引述《[email protected] ( )》之铭言:
: : 在下最近在抽取plasmid
: : 但是碍於菌种copy number太低了
: : 以致於在做digest>elute後band就不见了
: : 请问高手们在plasmid copy number太低时
: : 你们会做哪些protocol shooting?
: 可以试试看在菌种养起来之後
: 再加入少量的kanamycin (2~5mg/L)
: 可以抑制细菌的生长
: 但是并不会抑制plasmid的生成
: 因此可以增加copy number
这招式真的嘛?可不可以提供学理文献?真的没听过耶....
是所有菌种都可以嘛?还是哪些特殊的菌种?
如果copy number低的菌种,我想到的笨方法是养个1000ml 在去抽plasmid DNA
不然就把原来的plasmid DNA再transformation到high copy number 的菌种不就好了?
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