作者wa (三度西的好天气~)
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标题Re: 能否更改诱导及培养条件,让inclusion body的情 …
时间Thu Jul 27 09:30:35 2006
※ 引述《[email protected] ( )》之铭言：
: ※ 引述《[email protected] (raiken)》之铭言：
: > 如果只改变induction条件的话,一般就是测37度3小时或20度20小时
: > 再不然就是在放大完後,先冰一下做cold shake再去induction
: ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
: 这个方式还真的是第一次听到耶..
: > 或许有机会可以改善
: 基本上会变成inclusion body主要的原因
: 好像是因为重组蛋白质可能对细菌本身有害
: 可以试着不要让它表现量那麽高就有可能可以改善inclusion body的情形
: 试试看把inducer的量降低 或者培育的温度降低
: 时间够多的话就换一下vector
: pET system里面有一些vector带有signal peptide
: 可以把蛋白质分泌到paripalsmic space
: 这样有机会可以解决inclusion body的问题
: 不过还是要看蛋白质啦 不见得每种蛋白质都可以分泌出去的
我做过 18度 25度 or 37度
只induce <1.5 hr
就不会变成inclusion body
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