※ 引述《a64toto (我)》之铭言： : 之前在版上有看过一些相关的问题 : 可是还是有一些疑问想请教一下 : 我是使用Q牌的agarose gel extraction kit : 在使用前与使用後都有跑agarose确认有band出来 : 可是在transform都没有coloy长出来(接到pET 23a vector) 天阿 我跟你用同一个 vector 耶 而且我也还没做出来XD 我觉得可能是要提高 ligation 的 efficiency 吧 因为有时候做出来也只是几颗 如果效率再低一点可能真的就没有 colony了 : 可是接到T vector的都有长出blue colony : 所以应该不是transform出问题罗 : 那要check ligation有没有问题的话 : 好像positive control是放已经切好的vector是吗?这样一定会长出colony吗? : 还是我搞错啦 : 还有如果拿10 ul的ligation mixture(已经16度O/N)直接跑agarose gel : 这样能看得出来有没有接起来吗? : 最後我染agarose gel的dye是SYBR不是EtBR,请问这样会对ligation有影响吗? -- 天下最难的事，就是享受最简单平凡的日子 而最简单平凡的日子，往往是天下最单纯的幸福 --

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