作者yehlin (幻想世界)
看板Biology
标题Re: [请益] 自己表现的protein用来treat细胞
时间Fri Mar 31 19:04:50 2006
※ 引述《gidon (打球的幸福呢)》之铭言:
: ※ 引述《microball (研究院路的紫薇花)》之铭言:
: : 厄...你做出的蛋白有tag吗?
: His-tag 有阿
: 可是有用过的人也知道HIS的纯化程度对细胞而言是不够的吧
: : 如果有的话可以用此纯化,不然可能要用LC之类的纯化?
: 我有想过用FPLC(因为分子较大不适合HPLC)
: 可是不太清楚利用FPLC纯化出来的应该很纯了
: 但是像是外面公司卖的cytokine他们纯度是比这更纯还是已经够了?
HPLC也可以用在大分子啦...
你可以去看一些GPC的HPLC column...
如果你的分子量差异够分开的话...
这是个不错的选择...
另外要高纯度的话还可以考虑用Affinity Chromatography...
但你要先找出可以抓住你蛋白质的东西...
而且要可以接在gel上并且在一定条件下可以抢下你的protein的...
如果没有...也可以考虑用IEC...或许也是个选择...
: : 品质的话...可以用OD去算纯化後的浓度
: : 纯度的话...可以跑SDS gel
: 感谢大家的解惑
: 自己说一说怎麽觉得那我是不是应该打电话去问卖cytokine&growthfactor
: 的公司问他们他们怎麽做出来的@@"
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◆ From: 203.71.94.10