看板Biology
标 题Re: [问题]in situ hybridization
发信站KKCITY (Wed Mar 1 19:53:18 2006)
转信站ptt!ctu-reader!Spring!news.nctu!news.ntu!bbs.ee.ntu!news.kkcity.com.tw
※ 引述《kuuro》之铭言：
> 请问有人做过cultured cell的in situ hybridization吗?
> 如果要侦测的mRNA量可能不多,要用哪种方法好呢?
> 萤光还是酵素labeled的?
> 因为我要做RNAi, transfection的效率不够好,
> 做RT-PCR 应该看不出来吧?
> 又没有抗体可以做免疫染色,
> 所以想试试in situ hybridization
> 还是大家有其他建议吗?
> 谢谢!
sorry..
我的问题可能令人误解,
我在做vector based RNAi,
用RT-PCR可以很容易侦测到target mRNA,
假如有50%的细胞transfection成功(我目前的情况是不到10%)
并且knockdown 效率有70%的话,
那麽以整个population来说,
有RNAi和没有的,只有20%的差异,
这麽小的差异用RT-PCR, 甚至QRT-PCR可能都很难判别,
所以我才想看individual cell,
不用做selection或是cloning,
就可以知道结果...?
--
┌─────◆ＫＫＣＩＴＹ◆─────┐ ◢
◤ ★ 线上音乐新震撼 ★ ◢
◤
│ bbs.kkcity.com.tw │ ^_^ / 随选随播免等待 KKBOX◤ ^_^ /
└──《From:61.230.72.71
》──┘ ◤ http://www.kkbox.com.tw ◤
--