作者KidJay (Kasim我爱你啊)
看板Biology
标题[问题] 有关Genomic DNA PCR的问题
时间Tue Feb 14 19:43:03 2006
我目前要从genomic DNA当中利用PCR的方式撷取我的target sequence
之後要做construct测试其promoter activity
target sequence size 约 3.3KB 为一段promoter sequence
基於大小与正确性 预计使用pfu enzyme
想请问利用primer去夹这种genomic DNA
其primer design上有没有特别需要注意的地方
我与老师讨论过 他认为Tm值范围应介於60~65之间
其专一性才会够高(因为是自细胞抽的DNA去进行撷取)
但是这麽高 做的出来吗?
我以前做昆虫的genomic DNA PCR 57度就没有问题了
不知道板上各位先进的看法如何?
还有就是想请问这类的实验有没有特别需要注意的地方呢?
小弟在此先谢过了
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