※ 引述《[email protected] (wythe)》之铭言： : 想请问一下 : 利用Not1切plasmid有什麽技巧吗? : 可以把buffer和Not1混在一起以後再加入plasmid培养吗 : 因为我试了两次都失败了? : 有人可以告诉我为什麽吗 NotI应该是很好切才是啊！ 你或许可以嚐试看看，先注意buffer的浓度(2X或10X之类的) 把buffer的浓度先dilute到原倍，加入plasmid然後 「最後再放NotI」试看看。 这是我目前能想到的建议。 因为一般而言，enzyme都是最後放的，除了因为它很贵、维持活性以外 buffer的浓度对於酵素的作用也有影响 不知道是不是因为一开始你还没稀释buffer就直接把酵素加入造成的影响？ (如果一直切不出来的话，说不定是enzyme坏了…) -- 构成我们学习上最大的障碍是已知的东西 而不是未知的东西 --

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