作者lakerjackt (NN )
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标题Re: [问题] 我的电泳结果没有亮带 - 步骤
时间Sat Dec 24 14:25:39 2005
※ 引述《wulito (考完闷的紧)》之铭言:
: 取菌液 1 c.c.
: 以 10000 xg 离心5分钟
: 取沉淀 改加入 200ul 无菌水
: 煮沸 10mins 以 10000 xg 离心 5 mins
: 取上清液後
: 取 2ul 跑 PCR
: PCR 添加的药剂
: template 2 ul
: primer 各 1 ul
: 混合溶液 10 ul 内含
: polymerase 1.25 U
: MgCl2 1.75 mM
: dNTP 200 uM
: buffer <---- 这个产品上面没有写含量或浓度
: 无菌水 36 ul
: 之後以 95度 5 mins 1 cycle
: 95度 30 sec
: 55度 1 mins
: 72度 30 sec 35 cycle
你pcr的温度环境是不是有漏写..一般正常来说..在35cycle完以後
要再加个72度 x min..来方便做完未完全的pcr product长度..
最後才4度c
: 最後以 2% agarose 跑电泳
: 20 ml 的胶 以 5ul 的 ETBr 内染
: 如果有需要增补的地方
: 请各位大大告知 谢谢^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.70.173.237
1F:推 wulito:已经修正 谢谢你的提醒^^ 12/24 23:31