作者wulito (考完闷的紧)
看板Biology
标题[问题] 我的电泳结果没有亮带 - 步骤
时间Sat Dec 24 08:03:50 2005
取菌液 1 c.c.
以 10000 xg 离心5分钟
取沉淀 改加入 200ul 无菌水
煮沸 10mins 以 10000 xg 离心 5 mins
取上清液後
取 2ul 跑 PCR
PCR 添加的药剂
template 2 ul
primer 各 1 ul
混合溶液 10 ul 内含
polymerase 1.25 U
MgCl2 1.75 mM
dNTP 200 uM
buffer <---- 这个产品上面没有写含量或浓度
无菌水 36 ul
之後以 95度 5 mins 1 cycle
95度 30 sec
55度 1 mins
72度 30 sec 35 cycle
72度 7 mins
4度 保存
最後以 2% agarose 跑电泳
20 ml 的胶 以 5ul 的 ETBr 内染
如果有需要增补的地方
请各位大大告知 谢谢^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.170.1.27
1F：推 lakerjackt:你run的pcr长度有多长? 12/24 08:54
2F：推 kkelvin:2%gel 会不会太浓了啊... 12/24 13:17
3F：推 wulito:429 bp 12/24 23:28
※ 编辑: wulito 来自: 218.174.153.250 (12/24 23:31)
4F：→ wulito:谢谢^^ 12/24 23:33
5F：推 sidkawn:会不会是染剂坏了 或是浓度不对? 01/02 00:09