若找到解答, 请不吝与大家讨论, 若只是删去自己的问题, 是非常可惜的. retrovirus感染过程有个很重要的步骤, 就是cell cycle dependent recombination, 它以LTR在host genome中(可能为随机)插入viral gene, 这个recombinantion 与其後的步骤, 依插入位置方向与机构不同, 常会导致部分DNA会变异, 如LTR可能根本不见了或少个copy, 我猜想因此我们无法期待每个retrovirus 系统在二次感染中100%带有我们原本设计的基因. 您找到的解答是什麽呢? 愿意分享吗:) kuuro写道: >关於您所提供clontech user manual的第六页, 我还是有些疑问, >stable production 的方法中, drug resistance gene 位於两个 >LTR之间, 那些没有被transfected 的 packaging cell 将会被 >感染, 因此也得到了drug resistance gene, 如果感染的效率 >真的有其所宣称的100%, 那麽细胞怎会被药物杀死呢? 筛选出来的 >也不一定是一开始transfect 成功的细胞吧? > >再请教您, 您都是做一次infection就有很好的效率吗 ? 还是过十二小时 >有做第二次的infection呢? 我怎麽觉得protocol 写的和实际情况 >差好多喔, 谢谢您的解答! 我们家不是用Clontech系统的, 是用pMaRX系统的, 我们全部采用 Transient Production, 三天後所收到的virus在不稀释的情况下, 通常可以期待5~20%的细胞在selection後可以活下来. -- ┌─────◆ＫＫＣＩＴＹ◆─────┐▇─┐ＫＫＡＤＳＬ→六星级优质连线服务 │ bbs.kkcity.com.tw │┴ └─▇ 马上申请带你上网环游全世界！ └──《From:143.48.8.154 》──┘ KKADSL ┴ http://adsl.kkcity.com.tw --