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标 题Re: 请问protein 保存方法的问题
发信站中山计中美丽之岛 (Mon Nov 24 11:01:07 2003)
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> ==> [email protected] (卡在某个时间里) 的文章中提到:
> ※ 引述《[email protected] (......)》之铭言:
> > 最近纯化了一批蛋白质出来
> > 目的是要用来处理细胞
> > 我觉得我的蛋白质应该要分装 兵在-80
> > 要用时再拿其中一管来用 用完就丢 不重复使用
> > 可是这样很占空间 分装的话大概有上百管吧
> > (系上一个老师也这麽说)
> > 可是学长是说
> > 他把整管protein加glycerol冰在-80 re-use
> > 那我很疑或
> > 到底哪一种才是较好的
> > 有人有类似的经验吗
> > 谢谢
> 两者合并使用 另外 冷冻的protein浓度要高一点
> 不然protein解冻後会loss掉或是失去功用
> 如果你的protein在4℃算稳定的话 可以在4℃准备working stock
> 简单的说 储存在-80的protein浓度要高一点 一次大概分装成10~20管
> 再从这10~20管的stock里面挑一两管稀释到你平常做实验会用到的浓度
> 分装在4℃的working stock 每次做实验就从这这working stock拿一管去用
> 等到working stock用到快完的时候 再从-80取一管再稀释
> 祝好运
我的做法稍有不同。因为蛋白质测试的方法不同,稀释倍率就会不一样
所以稀释对我而言是麻烦的。
我的蛋白质一开始就是先用用1.5ml 离心管分装(装1.5ml),
把最後不足1.5ml 的分装到0.6ml 的小离心管(每管装0.1ml~0.2ml),
使用蛋白质的时候先使用0.6ml管子的,用不完冰回去,蛋白质解冻三
次就丢了(其实大部分蛋白质都很耐,但保险一点好)。0.6ml装的用完
了,那麽取出1.5ml装的做实验,顺便将没用完的分装成0.6ml装,
然後冰回去。我认为我的方法省空间、蛋白质变性的风险也不高,
值得参考。
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