看板Biology
标 题Re: 请问如何收细胞膜上的protein?
发信站不良牛牧场 (Sat Aug 16 08:50:32 2003)
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※ 引述《sirus (很自由..)》之铭言:
: 我的实验因为要看一种receptor蛋白质表现
: 那是不是要收细胞膜上的蛋白质才行
: 可是如果用一般收total protein的方法
: 可能会把膜都破坏掉了.....收到的蛋白质就会很少了
: 所以想请问有没有人收过细胞膜的protein
: 该怎麽做会比较好呢??
超高速离心阿
分离细胞上不同的胞器
再用相对对照各胞器的抗体
比如说你怎知到你的蛋白质是在膜上
你把经过超高速离心後各个 fraction 拿去跑电泳作 western
一般市面上有卖很多物种的 ATPase 的抗体
如果你的蛋白质与 ATPase 出现在同一个分划
就能代表你是膜蛋白
当然实际这实验要作很多conform
没这麽单纯
参考一下这篇
Chen, Y.F., Randlett, M.D., Jennifer, L.F., and Schaller, G.E.
(2002) Localization of the Ethylene Receptor ETR1 to the Endoplasmic
Reticulum of Arabidopsis Journal of biological chemistry
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