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标 题Re: 急急急.....谢谢
发信站兴大天枢资讯网 (Fri Aug 2 04:44:18 2002)
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※ 引述《[email protected]》之铭言:
> 可以告诉我
> 什麽是FPLC AND HPLC 吗?
> 谢谢^^
HPLC 是高效率液态层析仪,
你可以想象一般的管柱层析,只不过以高压高流速来粹取,
优点是可回收样品,注入的样品量较少,分离样品快速,
但这些都是针对在一般分析时的需求,
如果是针对需要回收样品的话,它的量太少,需要多次分离,
虽然最近有可以一次打几个mg的管柱出现,用於分离较低分子量的peptide,
例如我刚合成一段peptide,但可能不是很乾净,
此时便可使用HPLC来分离出我需要的样品。
FPLC 是快速液态层析仪,
其实其原理跟HPLC差不多,一样是用pump来加压加速分离的,
但它的管柱和HPLC不一样,其管柱外壳一律是用塑胶材质,
故使用的压力与流速,便不像HPLC那麽强,(哪种塑胶我就不知道罗)
它主要是用来分离蛋白质用的,可以分离的量也较大,
很多人一定会觉得奇怪,用HPLC也是一样的呀,为何一定要用FPLC呢??
这是因为蛋白质可能会跟HPLC的金属管壁键结(bind)在一起,
如此就得不到所要的蛋白质了,
且蛋白质也可能因为高压而变性,也是得不到想要的蛋白质,
价格上HPLC较便宜,大概30万就能买到不错的了...
而FPLC就要很多钱罗,而且台湾这边只有一个香港商的安法玛亚在代理,
贵死罗,我实验室那一台没有电脑连线的好像就要五十万吧,型号我忘了,
在维修上呢,HPLC较FPLC简单(找人来一下子就解决了),FPLC常出问题,
一下子O ring老化要换,一下子pump的酒精不够要加,
而当过压的情形太常发生时,就代表着过滤部份的membrane要换了...
烦的呢...
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